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BodBoge | 如何解決單細胞測序前的細胞質控?

更新時間:2023-04-04瀏覽:1087次

單細胞測序(single cell sequencing)是指先分離純化單個細胞,并提取該細胞的DNA或RNA進行擴增后測序的技術。該技術廣泛應用于腫瘤、微生物學、神經科學等重要生命科學領域,單細胞測序技術也逐漸成為了生命科學研究的熱點。相比于宏觀組織樣品的測序,單細胞測序對于細胞和組織的異質性具有更加明確的分辯,當然,難度也相對更高。

單細胞測序結合生命科學研究領域的應用,已逐步向著更高的分辯能力、靈敏度、和更多的維度邁進。


什么是單細胞測序?

單細胞測序是基于高通量測序(NGS)方法,可檢測單細胞基因組、單細胞轉錄組、單細胞表觀基因組,提供細胞間差異的高分辨率視圖,從分子水平揭示細胞奧秘。


樣本要求

01、 樣本總量

制備成單細胞懸浮液,一個樣本的細胞起始量需大于1x105。


02、 樣品濃度

最終上樣前細胞濃度在700-1200 cells/μL。


03、 細胞活性

活細胞比率85%以上。


04、  細胞大小

直徑小于40μm。


其它要求

1-細胞培養(yǎng)基及緩沖液不能含有Ca2+Mg2+等影響酶活性的物質。

2-組織需解離成單細胞懸液,植物細胞需制成原生質體。



為解決細胞計數(shù)準確性以及人工復核難的問題,博大博聚特推出一款全自動熒光細胞分析儀(JSY-FL-047"。儀器參照血球計數(shù)板計數(shù)規(guī)則,可實現(xiàn)人工比對儀器的計數(shù)結果。具有單細胞計數(shù)模式。為實驗用戶提供更可靠更高效的實驗解決方案。


全自動熒光細胞分析儀(JSY-FL-047)

1- 單細胞計數(shù)功能

儀器可識別出樣本中單個細胞所占比例聚團細胞所占比例,適合單細胞測序前對單個細胞的質控。


計數(shù)結果包含:總細胞數(shù)量、總細胞濃度、團聚活細胞團數(shù)(濃度-比率)、單個活細胞數(shù)量(濃度-比率)、總死細胞數(shù)量(濃度-比率)。

 

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